NED354493NED

0,5 %-ной перекиси водорода Н20 2 и 0,5 см 3 толуола. Колбу закрывают проб­ кой, встряхивают и ставят в термостат при температуре 30 °С на 30 минут. По истечении времени инкубации реакцию прекращают, прибавив в колбу 5 см 3 2 %-ной H 2 SO 4 . Образовавшийся пурпурогаллин извлекается многократным взбалтыванием смеси с серным эфиром в делительной воронке до обесцвечи­ вания раствора. Эфирный слой сливают в мерную колбу, соединяя все эфирные вы ­ тяжки, доводят серным эфиром до метки, перемешивают и колориметрируют на фотоэлектроколориметре при длине волны 450 нм (синий светофильтр). В исследуемой вытяжке должно содержаться не менее 2 мг пурпурогаллина. Количество пурпурогаллина находят по калибровочному графику. Построение калибровочного графика. В мерные колбы объемом 50 см 3 приливают определенные возрастающие количества образцового рас­ твора двухромовокислого калия К 2 Сг 2 0 7 (0,75 г х. ч. реактива растворяют в 0,5 и. НС1 и доводят объем раствора в мерной колбе до 1 дм3), 1 см 3 которого соответствует 0,5 мг пурпурогаллина. В дальнейшем повторяют все операции как и при анализе опытной почвы. Ошибка определения не должна превы­ шать ± 8 %. На оси абсциссы откладывают количество пурпурогаллина в соответ­ ствующем объеме образцового раствора, на оси ординаты- величины оптиче­ ской плотности. Вычисление результатов анализа. Активность пероксидазы рас­ считывают по формуле: v _ а -р -100 А ------------------- т ’ где X - активность пероксидазы, мг пурпурогаллина на 100 г почвы за 30 минут; а - количество пурпурогаллина, найденное по калибровочному графику, мг; р - разведение; m - навеска почвы, г; 100 - коэффициент для пересчета на 100 г почвы. 11.6.7. Определение активности инвертазы (Р-фруктофуранозид - фруктогидролаза. КФ 3.2.1.26) Принцип метода, p-фруктофуранозидазы (сахараза, инвертаза) гид­ ролизуют сахарозу на глюкозу и фруктозу. Фермент находится во всех поч­ вах и является одним из важных ферментов, характеризующих биологическую активность почвы. Метод основан на изменении количества редуцирующих гексоз (глю­ козы и фруктозы), образующихся при гидролизе сахарозы. Сумму редуциру­ ющих гексоз выражают в глюкозном эквиваленте и на способности глюкозы и фруктозы, образующихся при гидролизе сахарозы, восстанавливать медь раствором Феллинга. По количеству образовавшейся меди определяется со­ держание сахаров в растворе (метод Бертрана). При смешивании раствора сернокислой меди (C uS04) с щелочным раствором сегнетовой соли СбН 406 • KNa • 4Н20 на первом этапе реакции C u S 0 4реагирует с щелочью: 106