NED354493NED

50 см 3 до метки, перемешивают и фильтруют в другую мерную колбу объе­ мом 50 см3, доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают. В случае получения мутной вытяжки в колбу добавляют 1 см 3 насыщенного раствора алюмокалиевых квасцов. Затем 20 см 3 фильтрата помещают в фарфоровую чашку и выпарива­ ют на водяной бане до 1 капли фильтрата (при пересушивании сухого остат­ ка могут быть потери нитратов). В фарфоровую чашку пипеткой приливают 1 см 3 дисульфофеноловой кислоты и тщательно растирают сухой остаток стеклянной палочкой. Через 10 минут после растирания сухого остатка в чашку прибавляют 15 см 3 дистиллированной воды и опускают в раствор ку­ сочек лакмусовой бумажки. Из бюретки в чашку приливают 10 %-ный рас­ твор NaOH до окрашивания лакмусовой бумажки в синий цвет. При этом образуется комплексное соединение желто-оранжевой окраски. Если раствор помутнеет, добавляют 2-3 капли щелочи. Содержимое чашки количественно переносят в мерную колбу объе­ мом 50 см 3 через небольшую воронку без фильтра. Раствор доводят дистил­ лированной водой до метки, закрывают пробкой и перемешивают. Раствор можно сразу колориметрировать на фотоэлектроколориметре при длине вол­ ны 450 нм (синий светофильтр). Количество нитратного азота в растворе находят по калибровочному графику. Разница между количеством N 0 3~, внесенного в почву в составе субстрата K N 0 3 (1 см 3 1 %-ного K N 0 3 содержится 6,13 мг N 0 3”) и опреде­ ленного в реакционной смеси, равняется количеству восстановленного нит­ ратного азота. Построение калибровочного графика. В мерные колбы емкостью 50 см 3 приливают определенное возрастающее количество рабочего образцо­ вого раствора K N 0 3 (х. ч.), содержащего в 1 см 3 0,002 мг нитратного азота, и осуществляют все операции, как и при анализе почвы. Запасной образцовый раствор K N 0 3 готовят следующим образом: на аналитических весах взвеши­ вают 0,722 г K N 0 3, переносят в мерную колбу объемом 1 дм3, растворяют в дистиллированной воде и объем доводят до метки (в 1 см 3 раствора содер­ жится 0,01 мг N-NO 3 ). Рабочий образцовый раствор готовят разведением запасного образцового раствора в 50 раз. На оси абсциссы откладывают содержание нитратного азота в соот­ ветствующем объеме рабочего образцового раствора K N 0 3, на оси ординаты - величины оптической плотности. Вычисление результатов анализа. Активность нитратредуктазы рассчитывают по формуле: а ■р • 10 Х = — ------, m где X - активность нитратредуктазы, мг восстановленного N 0 3” на 10 г почвы за сутки; а - содержание нитратного азота, найденное по калибровочному графику, мг; р - разведение; ш - навеска почвы, г; 10 - коэффициент для пересчета на 10 г почвы. 102